¿Cuál es el estado de metilación del ADN de los espermatozoides de los genes impresos en parejas masculinas de parejas que experimentan pérdida recurrente del embarazo (RPL)?

Aberraciones en el estado de metilación del ADN de los espermatozoides de varios genes impresos, como la región metilada diferencialmente del factor de crecimiento similar a la insulina 2-H19 ( IGF2-H19 DMR ), la región metilada diferencialmente intergénica ( IG-DMR ), la transcripción específica del mesodermo ( MEST ), el dedo de zinc proteína que regula la apoptosis y la detención del ciclo celular ( ZAC ), DMR en el intrón 10 del gen KCNQ1 ( KvDMR ), gen 3 expresado paternalmente ( PEG3 ) y gen 10 expresado paternalmente ( PEG10 ), así como disminución de 5-metilcitosina global de esperma (5mC ) niveles, están asociados con RPL.

La RPL se define como la pérdida de dos o más embarazos, que afecta al 1-2% de las parejas en edad reproductiva. Aunque hay varios factores etiológicos maternos y paternos que contribuyen a la LPR, casi el 50% de los casos siguen siendo idiopáticos. Por lo tanto, existe la necesidad de identificar factores paternos putativos que podrían estar contribuyendo a la pérdida del embarazo en casos de LPR idiopática.

En este estudio de casos y controles, se reclutaron 112 parejas que se sometieron a RPL sin una causa identificable entre septiembre de 2015 y mayo de 2018. El grupo de control estaba compuesto por 106 parejas fértiles probadas sanas sin antecedentes de infertilidad o aborto espontáneo.

En este estudio, investigamos los factores genéticos y epigenéticos paternos que podrían estar asociados con la RPL. Estudiamos la metilación del ADN, mediante pirosecuenciación, de genes impresos seleccionados implicados en el desarrollo embrionario, como IGF2-H19 DMR , IG-DMR , MEST , ZAC , KvDMR , PEG3 , PEG10 y polipéptido N de ribonucleoproteína nuclear pequeña ( SNRPN ) en espermatozoides de hombres. cuyos socios presentan RPL. La metilación global del ADN en los espermatozoides se evaluó mediante el estudio del contenido de 5mC y la metilación del promotor del elemento nuclear 1 ( LINE1 ) intercalado durante mucho tiempo . También estudiamos polimorfismos por pirosecuenciación en el IGF2-H19 DMRasí como en el promotor de IGF2 en ambos grupos.

En el grupo RPL, encontramos una disminución significativa en los niveles globales de espermatozoides 5mC y una disminución significativa en la metilación del ADN en tres sitios CpG en el promotor LINE1 . Para IGF2-H19 DMR e IG-DMR , se observó una disminución significativa en la metilación del ADN del esperma en sitios CpG específicos en el grupo RPL. Para genes con impronta materna como MEST , ZAC , KvDMR , PEG3 y PEG10 se observó hipermetilación. Los estudios de polimorfismo para IGF2-H19 DMR e IGF2 revelaron diferencias significativas en las frecuencias genotípicas en machos.

En este estudio, analizamos los niveles de metilación de genes impresos candidatos seleccionados implicados en el desarrollo del embrión. La detección de cambios de metilación que ocurren a nivel de todo el genoma puede revelar más genes candidatos que tienen una mejor distinción entre los grupos de control y de estudio.

Nuestro estudio demuestra que ciertos polimorfismos y el estado de metilación aberrante de los espermatozoides en los genes impresos están asociados con la RPL y podrían contribuir a la etiología de la RPL. Este estudio sugiere que la investigación de factores genéticos y epigenéticos paternos podría ser útil en la identificación de posibles causas de RPL idiopática.

Este estudio fue financiado por el Departamento de Ciencia y Tecnología, la Junta de Investigación en Ciencia e Ingeniería (EMR / 2014/000145) y los fondos intramuros del Instituto Nacional de Investigación en Salud Reproductiva (RA / 872 / 01-2020). Todos los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.